一、样品收集
样品的正确采集是准确反映临床发病率的基础。不正确的取样会明显降低检测阳性率,甚至可能检测不到阳性的病例。
1、什么样的拭子可以用于凯创衣原体检测试剂盒检测?
凯创衣原体检测试剂盒已提供专用的女用拭子,如果操作者自行选择,须选用消毒的涤纶、亚麻拭子或细胞刷,孕妇不可使用细胞刷。皙拭子明显影响检测结果,切勿选用。男性拭子由操作者自行选用。
2、拭子取样时应注意什么?
由于衣原体主要寄生在宫颈或尿道柱状上皮细胞内,因此取样时应尽可能行到更多的柱状上皮细胞,而不黏液和脓血。女性宫颈取样:操作人员应先用棉签或棉球将宫颈口黏液和脓血擦去后扔掉,再用取样拭子插入宫颈管内并通过鳞柱状上皮交界处,直到拭子头看不见为止。旋转拭子15-20秒钟取出,注意不要有碰到宫颈外及阴道壁。男性尿道取样:必须使用专用男用拭子,否则可能造成伤害;取样前至少一小时应无排尿,排尿将会降低阳性率;取样时应先用棉签或棉球将尿道口黏液和脓血擦去后扔掉,再用男用拭子插入尿道内2-4cm,旋转拭子3-5秒钟后取出。取尿道口黏液或脓血的拭子不可用本试剂盒检测。
取样后拭子上如事有黏液、血液等分泌物会明显影响检测准确性。
检测时如果取两份样品,检测结果有可能会不一致。因为取第一份样品时也许已经带走取样部位大部分被感染的细胞,如果在同样的部位取第二根拭子,其结果必然会因感染细胞减少而降低阳性率。另外,不同部位取样也可能存在差异。
3、如果要保存样品,是否需要放在培养基中?
不要将拭子放入任何培养基或液体中。凯创衣原体检测试剂盒并不要求样品中的衣原体抗原是存活的,如果需要保存样品,请选用干燥洁净的试管密封储存。
4、取样后的拭子如果保存?
取样后的拭子在室温可保存4-6小时,2-8℃可保存24小时,我们建议样品采集后尽快进行检测,样品不要冷冻,否帽会降低阳性率。
二、实验步骤
样品的不当处理也是明显降低检测阳性率的重要原因。其他公司的衣原体试剂的组分(配件,处理液,质控液等),均不可用于凯创衣原体检测试剂盒。
1、样品处理液加入不当会对检测结果产生什么影响?
首先,应保证加入的样品处理液A和B的体积是准确和相等的,均为6滴,此时,溶液应呈淡黄色。不可多加A或B,如不小心多加了,应补偿少加的部分使它们等量,或重新取样。如果处理液加入量太少,会使样品得不到完全的处理,如果加入量太多则会使样品稀释,两者均会降低阳性率。
另外滴加进,让溶液瓶垂直,以保证每滴溶液的量是相等的。
如果加A液太少或B液太多,有可能会产生假阳性结果;如果加A液太多或B液太少,甚至忘了加B液时,处理溶液可能仍呈淡蓝色。检测敏感度会明显降低,甚至C线也会减弱或消失。
2、取样拭子处理不当会对检测结果产生什么影响?
在加入适量样品处理液A到处理管并插入取样拭子后,一定要2分钟的处理时间。在此期间,要不断挤压和旋转并在管壁挤压拭子,将拭子中液体充分挤出后再扔掉拭子。以上操作尤为重要,必须严格执行,否则会明显降低检测阳性率。
3、经过A、B液处理后的样品放置多久使用,不影响检测结果?
样品处理后应尽快检测,有利于保证结果的准确性。如果来不及检测,样品最多可放置在室温60分钟。
4、判读时间已到,而C线未出现,是什么原因造成的?
(1)正确操作是2-3滴加样量,如果滴入试剂盒加样孔内的样品不足2滴,有可能使得液体无法层析到C线区,或者加入量过多,导致液体冲出溢水,使胶体金释放受影响。
(2)样品中因含有过多脓性、血性分泌物而过于粘稠,也可能会导致液体无法层析到C线区。
(3)另外,在处理样品但忘了加B液时,液体能层析到C线区,但有可能T和C线均不出现。
(4)产品已失效或装配有问题。
5、何时才能判读结果?
正确的判读时间是在10分钟以内,少数可能性疑的样品需要适当延长判读时间到15分钟或重新取样检测。15分钟以后,出现的T线可能是弱阳性或假阳性,建议重新取样检测。
三、试剂盒的贮存
1、凯创衣原体检测试剂盒如何保存?
保存在室温4-30℃,其有效期为24个月。
未冷藏的试剂盒,打开包装袋后请立即使用;冷藏的试剂盒,在打开包装袋前必须先恢复至室温。产品未复温或包装袋打开时间过久而受潮,会使得液体层析速度缓恒,并影响检测结果的准确性。
2、如果检测试剂盒的密封袋破裂可否使用?
检测试剂盒会因为密封袋破裂而受潮吸湿,影响检测结果,所以不能再使用。
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